您的位置: 网站首页 >> 技术文章 >> 菌种的是要主要有哪些注意事项

菌种的是要主要有哪些注意事项

更新日期: 2019-09-11
浏览人气: 2405
   菌种在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。
 
  菌种保藏是将微生物菌种采用适宜的方法妥善保藏,避免其死亡、污染,并保持其原有性状基本稳定的一种实验方法,也是微生物实验室极为重要的一项基础性工作。
 
  甘油冷冻保藏菌种是目前实验室应用为广泛的一种的菌种保藏方法,原理是以甘油为保护剂,低温冷冻条件下,使微生物的新陈代谢趋于停止,从而达到长期有效的保藏。一般来说,保藏温度越低,保藏效果越好,目前实验室大都采用-80℃(-70℃)冰箱保藏。主要有以下注意事项:
 
  1.选择合适的培养基
 
  勿使用选择性培养基。一般使用非选择性的增菌培养基,因为微生物在选择性培养基中生长某些生物特性可能丢失,保藏的菌种的生物特性可能与标准菌株特性不同。
 
  2.菌液的浓度
 
  菌液的浓度一般越大,菌种保存时间越长。保藏时细菌常使用菌液,霉菌常用无菌水或生理盐水制备成的孢子悬液。
 
  3.甘油浓度
 
  甘油终浓度一般为10%~20%。由于甘油原液太粘稠,需要配制合适的甘油-水溶液,将菌悬液与甘油以1:1的体积比充分混匀后,分装至提前灭菌好的保藏管中,-80℃(-70℃)冰箱保存。
 
  4.反复使用
 
  对菌种进行保藏时注意“慢冻快化”,冷冻时降温速率保持1℃/min,复苏时用37℃水浴融化,能够保证菌种大的成活率。当冷冻菌种融化后,应避免再次冷冻,否则菌体的生存率会大幅度降低。
 
  5.保存时间
 
  该方法适合中长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右。
 
分享到:
版权所有©2019 上海晅科生物科技有限公司 备案号:沪ICP备19006485号-1
  • 扫一扫,关注我们