植物叶绿醇激酶ELISA试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中指标表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中指标相结合，经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）与待测样品中植物叶绿醇激酶浓度呈正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中植物叶绿醇激酶的浓度。
样本准备：
血清：采集后3000转/分离心10分钟，分离血清。
血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转/分离心30分钟取上清。
组织匀浆：加生理盐水捣碎组织，3000转/分离心10分钟取上清。
所有样本若不立即检测，应分装冻存于-20℃，避免反复冻融。
试剂准备：
试剂盒在2-8℃保存，使用前室温平衡20分钟。
20×洗涤缓冲液按1：19比例用蒸馏水稀释成1×工作液。
操作步骤：
取出所需板条，设置标准品孔（S0-S5）和样本孔。
标准品孔加50μL不同浓度标准品；样本孔先加10μL待测样本，再加40μL样本稀释液。
每孔加入HRP标记的检测抗体100μL（空白孔除外），封板后37℃温育60分钟。
弃去液体，拍干，每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩净，重复5次。
每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。
每孔加终止液50μL，15分钟内于450nm波长下测定OD值。
结果计算：
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。
根据样本OD值在曲线上查得对应浓度，乘以稀释倍数（通常为5）即为实际浓度。
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更新时间：2026-05-12
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