家蚕卵黄蛋白(LT)检测试剂盒的操作流程

试剂盒采用经典双抗体夹心法：微孔板内预包被高特异性的家蚕LT单克隆捕获抗体，加入待测样本后，样本中的LT蛋白与固相抗体结合；再加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的检测抗体，形成“捕获抗体-LT-酶标抗体”的三明治免疫复合物；经TMB底物显色后，在450nm波长下测定吸光度，颜色深浅与LT蛋白浓度呈正相关，通过标准曲线即可精准换算出样本中LT的实际含量。

操作流程：

所有试剂提前从冰箱取出，回温至20~25℃，按比例稀释浓缩洗涤液，梯度配制不同浓度的LT标准品

分别设置空白孔、标准孔、待测样品孔，每孔加入100μl标准品或处理好的待测样本，封板后37℃孵育90分钟

弃去孔内液体，拍干后加满洗涤液静置30秒，重复洗板5次；每孔加入HRP标记酶标试剂50μl（空白孔除外），37℃再孵育60分钟

再次洗板5次后，依次加入显色剂A、B各50μl，轻轻混匀后37℃避光显色15分钟

每孔加入50μl终止液终止反应，15分钟内用酶标仪在450nm波长下测定各孔吸光度（OD值），通过标准曲线拟合计算出样本中LT蛋白的实际浓度