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实验出真知,DNA释放剂在使用时的注意事项

更新日期: 2021-03-08
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  DNA释放剂是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品制备可以直接进行 PCR、LAMP扩增的模板
  由于试剂需要用户自己针对不同的物品摸索用量,所以在使用时有几下几点注意事项
  1..未列出样品,用户需要自己摸索用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花), 组织使用量不要超过 0.5mg。
  2. 加入 100 uL 溶液 A 工作液,确保固体样品被溶液淹埋,如果是液体样品则震荡 混匀。
  3. 95℃保温 10 分钟。
  4. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。这些 DNA 释放液足够 进行 50-100 次 PCR 或 LAMP 扩增。
  5.DNA 释放液体积不要超过 PCR 体积的 1/10。
  6. 放入 PCR 仪中进行 PCR,PCR 参数需要根据引物 Tm 值和靶分子长度等参数设 置。一般不低于 35 次循环。
  7. PCR 结束后取 5-10 uL 直接上样电泳(本产品不需要上样液即可直接上样),红 色染料电泳速度相当于 50 bp DNA 片段。
  8. 如果没有预期的扩增,细胞裂解液中可能是有 PCR 抑制剂(植物、土壤和血液等 DNA 样品常含此类抑制物),建议把细胞裂解液分别稀释 10 倍和 100 倍再用 3uL 进行 PCR 扩增。也可以在 PCR 体系中加入 1/10 的本公司的 PCR 抑制物清除剂。
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