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产品名称:

猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)荧光探针PCR核酸

产品型号: 产品时间: 2023-07-05
猪胃肠炎流行腹泻轮状TGEVPEDVPRV-A荧光PCR根据猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒设计特异性引物和探针,用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒适用于检测分泌物、血液、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等样本中的TGEV/PEDV/PRV-A。

产品概述

猪胃肠炎流行腹泻轮状TGEVPEDVPRV-A荧光PCR说明书

【产品名称】

通用名称:猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)???核酸检测试剂盒(实时荧光-PCR法)

Name :Porcine transmissible gastroenteritis / porcine epidemic diarrhea virus / swine group A rotavirus (TGEV/PEDV/PRV-A) nucleic acid detection kit (real-time fluorescence -PCR)?

【包装规格】48T/盒

【预期用途】

猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)???感染引起的猪急性、热性、高度接触性传染病。其特征为高热,网状内皮系统出血,死亡率高。家养猪和野猪都可以被感染,而且不分品种和年龄。

本试剂盒适用于检测分泌物、血液、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等样本中的猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)???,用于猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)???感染的辅助诊断。

【检验原理】

本试剂盒根据猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻病毒/猪A组轮状病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)???基因组设计特异性引物和探针,用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

【试剂组成】

名 称 规 格

核酸提取液 1.5mL×2 管

酶液 50μL×1 管

反应液 1.0mL×1 管

阳性质控品 50μL×1 管

阴性质控品 250μL×1 管

注:

1)不同批号试剂不能混用。

2)试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融少于 7 次,有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

病死或扑杀猪,取分泌物、血液、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。

【使用方法】

1.样品处理(样本处理区)

1.1样本前处理

组织样品:每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g,手术剪剪碎混匀后取

0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;全血样本:待血凝固后,取血清 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。

1.2DNA 提取

1)对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液,100℃恒温处理 10min,13,000

rpm 离心 5min,取上清液转移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

2)DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒

(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。

2.试剂配制(试剂准备区)

根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:

试剂 ASFV 反应液 酶液

用量(样本数为 N) 20μL 1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中,21uL/管。

3.加样(样本处理区)

 

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。

4.PCR 扩增(核酸扩增区)

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;

4.2设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;

荧光通道选择: 检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)

NONE,ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光,选择 None 即可。

5.2结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。

可疑:检测通道 Ct 值>35.0,且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性,否则为阴性。

阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。

【参考文献】

[1]国家质量监督检验检疫总局. SN/T 1559-2010 非洲猪瘟检疫技术规范[S].

[2]黄萍, 肖家勇, 欧阳振宇. 非洲猪瘟病毒实时荧光定量 PCR 检测方法的建立[S]. 中国动物检疫, 2010.

[3]董志珍, 侯艳梅, 赵祥平. 非洲猪瘟病毒实时荧光定量 PCR 检测方法的建立[S]. 中国兽医杂志, 2009.

公司优势:
1)质量:我司提供的的试剂为世界
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