柱式血液DNA提取试剂盒

柱式血液DNA提取试剂盒是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人 和禽类)抗凝全血中提取基因组 DNA 的试剂。它具有下列特点：

1. DNA 纯净，OD260/280 在 1.8-2.0 之间。不含蛋白质和 RNA 污染，可直 接用于 PCR、酶切、杂交等。

2. 产量高，一般为 1-10 ug/mL 全血(对哺乳动物血液)。

3. 操作简单，整个过程约 20 分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。

4. 用量广泛， 每次可以处理少达 20 uL（对禽类动物血液）， 多达 1 mL 的血 液(对哺乳动物血液)。

5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

常温运输和保存，有效期一年​

1. 在 0.02-1 mL 新鲜或抗凝血液（冷冻血需先 37℃水浴融化）中加入 0.5 mL 红细胞裂解液（A 型），吹打混匀。注意：溶液 A 非常容易长菌，取用需要在 无菌条件下进行。

a) 哺乳动物，血液使用量以 300 uL 以下为宜，使用量越大产量越高，但 产率会降低。如果血液多于 300 uL，重复 1-2 步两次可以提高产率。

b) 禽类动物，血液使用量以 20 uL 以下为宜，可以从第 3 步做起。

2. 室温 12,000-15,000 rpm 离心 5 分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。

3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般 可以省略。

4. 向有沉淀的离心管内加入 0.5 mL 溶液 A（溶液 A 有少量晶体沉淀，用前需 要摇晃均匀），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释 放 DNA，所以吹打越充分越好。

5. 静置 2 分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置 2-5 分钟， 以使 DNA 与膜充分结合。

6. 12,000 rpm 离心半分钟，DNA 将吸附到膜上，弃收集管中的废液。

7. 加入 0.7 mL 的通用洗柱液，12,000 rpm 离心半分钟，弃收集管中的废液。

8. 加入 0.3 mL 的通用洗柱液，12,000 rpm 离心半分钟，弃收集管中的废液。

9. 12,000 rpm 离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通 用洗柱液，否则会影响后续反应。

10.将离心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料离心管（自备）中，加入适量 30-100uL DNA 洗脱液 2.0，室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 在 65℃预热后 再使用，洗脱 DNA 的效果会更好。

11. 12,000 rpm 离心半分钟，离心管底溶液即 DNA 溶液。可以立即使用或放 冰箱长期保存。​

柱式血液DNA提取试剂盒​