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产品名称:

禽流感H5亚型抗体ELISA检测试剂盒

产品型号: 产品时间: 2023-03-08
禽流感又名真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽类的一种急性、高度致死性传染病,以急性败血性死亡到无症状带毒为特征。
禽流感H5亚型抗体ELISA检测试剂盒用于检测禽类血清中禽流感H5病毒抗体,可用于免疫效果评价、辅助诊断等。

产品概述

禽流感H5亚型抗体ELISA检测试剂盒

使用说明书

【产品名称】

通用名:禽流感H5病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Avian Influenza H5 Virus (ELISA)

【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

【预期用途】 禽流感又名真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽类的一种急性、高度致死性传染病,以急性败血性死亡到无症状带毒为特征。

本试剂用于检测禽类血清中禽流感H5病毒抗体,可用于免疫效果评价、辅助诊断等。

【原    理】

    本试剂盒由预包被禽流感H5病毒抗原的酶标板、抗体工作液、酶标记物及其他配套试剂组成,应用竞争酶联免疫法原理检测禽血清或血浆中禽流感H5病毒抗体。实验时在酶标板中加入稀释的待检血清和抗体工作液,若样品中含有禽流感H5病毒抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合,从而使后续反应不出现显色;反之则出现显色;显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有禽流感病毒抗体。

【试剂盒组成】

序号

名称

规格/96T×1

规格/96T×2

规格/96T×5

1

酶标记物

11ml×1(红盖)

11ml×2(红盖)

26ml×2(红盖)

2

抗体工作液

6ml×1(蓝盖)

11ml×1(蓝盖)

26ml×1(蓝盖)

3

20X浓缩洗涤液

40ml×1(白盖)

40ml×1(白盖)

200ml×1(白盖)

4

底物液A

6ml×1(白盖)

11ml×1(白盖)

26ml×1(白盖)

5

底物液B

6ml×1(黑盖)

11ml×1(棕盖)

26ml×1(黑盖)

6

终止液

6ml×1(黄盖)

11ml×1(黄盖)

26ml×1(黄盖)

7

阳性对照

1.0 ml×1(红盖)

1.5 ml×1(红盖)

2.0 ml×1(红盖)

8

阴性对照

1.0 ml×1(绿盖)

1.5 ml×1(绿盖)

2.0 ml×1(绿盖)

9

酶标板

96T×1

96T×2

96T×5

10

盖板膜

1

2

5

11

自封袋

1

1

2

12

说明书

1

1

1

 

【储存及有效期】 2~8℃保存,有效期12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。

【样品准备】

  1. 血清/血浆:取动物全血按常规方法制备血清或血浆,要求血清/血浆清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

      蛋黄:取2ml新鲜蛋黄加2ml生理盐水震荡混匀,3000转/分钟离心15分钟,取上清作为样本。

  1. 待检血清、血浆或已处理蛋黄样本恢复室温、混匀待用。阴、阳性对照不用稀释。
  2. 浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。

【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl;样品孔每孔先加入40μl工作洗涤液,再加入10μl待检样本(稀释比例为1:5)。

4.每孔加抗体工作液50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。

5.甩去孔内液体,每孔加350 ul工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,后一次拍干。

6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应15分钟。

9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。。

【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照吸光值≥1.0,阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。

【检验结果的解释】

1.PI=(1-样本值/阴性对照孔均值)×100%;

2.未曾免疫鸡群:PI≥50为阳性;PI<50为阴性。

3.免疫鸡群:监测并记录样本当时的抗体水平,根据结果分析抗体水平的分布及鸡群免疫状态的动向。

【试验方法的局限性】

    该试验仅作为定性检测禽流感H5病毒抗体,根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

【注意事项】

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以*溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8.禽流感H5亚型抗体ELISA检测试剂盒不同批号试剂组分不得混用。

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