猪伪狂犬病毒gB蛋白抗体ELISA检测试剂盒

一、猪伪狂犬病毒gB蛋白抗体ELISA检测试剂盒

通 用 名  猪伪狂犬病毒gB蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒

英 文 名  BLocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus  gB Antibody 

【主要组分与含量】

【作用与用途】  用于检测猪血清中伪狂犬病毒抗体。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒取出置室温回温，至少30分钟，实验完成后置2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（7）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。

（8）使用样品稀释板将所有待检血清稀释好，再进行检测。

【用法与判定】 

1  用法

1.1  样品准备  取动物全血，4000r/min离心10分钟，收集上清。或采集血液，待凝固后自然析出血清。血清清亮，无溶血。

1.2  样品稀释  在血清稀释板中，用样品稀释液按1:1的比例稀释待检血清（例如：120μL样品稀释液中加120μL待检血清）；阴性、阳性对照不稀释，直接使用。

1.3  洗涤液配制 20倍浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（20~25℃），然后用蒸馏水或纯水作20倍稀释。

1.4  操作步骤

1.4.1  取抗原包被板（根据样本多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液300µL，不必静置，弃掉孔中洗涤液，洗涤2次，最后一次拍干。每孔加入稀释好的样本100μL；另外设阳性对照、阴性对照各2孔，100μL/孔。置37℃孵育60分钟。

1.4.2  弃去板中液体，每孔加入稀释好的洗涤液250µL，弃掉孔中洗涤液，重复洗涤共计洗板5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μL酶标记物，轻微振荡混匀。置37℃下孵育30分钟。

1.4.4  弃去板中液体，洗涤5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物显色液100µL，室温（20~25℃）避光显色10分钟。

1.4.6  每孔加终止液50µL。10分钟内用酶标仪测定并记录各孔在450nm波长处的吸光度（OD）值。

2  判定

2.1  成立条件   试验成立条件是阴性对照的OD_450nm平均值≥0.6，阳性对照的OD_450nm平均值≤0.5。

2.2  判定标准  S为样品孔OD_450nm值，N为阴性对照OD_450nm平均值。如果S/N≤0.6判为阳性。如果0.6＜S/N≤0.7判为可疑。如果S/N＞0.7判为阴性。

【规格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】  2~8℃保存，有效期为12个月。

温馨提示：抗原包被板真空包装袋若有漏气，抗原包被板仍然正常有效， 不影响实验结果，请放心使用。                        

    仅供科研使用

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