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产品名称:

汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒

产品型号: 荧光PCR法 产品时间: 2023-03-08
汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒适用于检测病患血液、尿液及病变组织中的汉坦病毒 RNA,适用于汉坦病毒感染的辅助诊断。 【检验原理】
本试剂盒对汉坦病毒基因组保守区设计特异性的引物和探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对汉坦病毒 RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

产品概述

汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒
【产品名称】 
商品名称:汉坦病毒通用型(HTV-U)检测试剂盒(荧光 PCR 法) 
Name  : Hantavirus Detection Kit(Real-Time PCR Method) 
【包装规格】50T/盒 
【预期用途】 
汉坦病毒通用型(HTV-U)核酸检测试剂盒适用于检测病患血液、尿液及病变组织中的汉坦病毒 RNA,适用于汉坦病毒感染的辅助诊断。 【检验原理】 
本试剂盒对汉坦病毒基因组保守区设计特异性的引物和探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对汉坦病毒 RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。 

【试剂组成】

注: 
1)不同批号试剂不能混用。 
2)试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。 
【储存条件及有效期】 
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过5 次,有效期12 个月。 
【适用仪器】 
ABI 、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量PCR 检测仪。 
【标本采集】 
抽取全血5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管,或采集患者尿液、病变组织。 
【保存和运输】 
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6 个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。 
【使用方法】 
1. 样品处理(样本处理区) 
1.1 样本前处理 
血液:直接取100μL 于灭菌离心管中或取血清100ul 于灭菌离心管中 
尿液:取100μL 于灭菌离心管中; 
组织样品:称取组织样品约 0.5g,置于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,匀浆后取 100μL
于1.5mL 灭菌离心管中; 
1.2 核酸提取 
推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作。 
2. 试剂配制(试剂准备区)

根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;反应管数每满10 份,多配制1 份),每测试反应体系配制如下表:

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中,21uL/管。

3. 加样(样本处理区)

将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。 
4. PCR 扩增(核酸扩增区) 
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内; 
4.2 设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择: 
检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列仪器请勿选择 ROX

选择 None 即可。 
4.3 推荐循环参数设置:
. 结果分析判定 
5.1 结果分析条件设定

设置Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

.2 结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线; 
可疑:检测通道 35阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。 
6. 质控标准

阴性质控品:Ct>38 或无 Ct 值显示; 
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且Ct 值≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。

【生产企业】 
企业名称:上海晅科生物科技有限公司

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