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一、一抗选择需要确定或参考的信息(一)目的蛋白的信息确定想检测的目的蛋白是否与抗体识别蛋白信息吻合,注意中英文名字、别名等信息。某些蛋白具有多种不同的亚型,这需要在选择抗体之前确定要研究的蛋白亚型。还有些抗体由于其抗原选择的是不同蛋白亚型共有的肽段区域,是可以同时识别多个亚型的。有的蛋白通过剪切加工才能转变为成熟的活性形式,如Caspase、Insulin等,这就需要根据研究需要,选择针对前体或成熟形式的特异性抗体。(二)抗体制备所用抗原的信息抗体是由各种不同抗原免疫宿主而制...
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技术讲堂—抗体相关知识(1)抗体(antibody)是生物体在抗原物质刺激下,由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白(Ig)。按抗体的来源,可将其分为天然抗体和人工制备的抗体,是通过对特定生物体免疫接种特定抗原物质后而获得。人工免疫动物制备的抗体应用甚为广泛,既可以用于科学研究,也可以用于疾病的预防、诊断和治疗。一、抗体的基本结构经x线晶体衍射结构分析发现,抗体Ig由四条多肽链组成,各肽链之间由数量不等的链间二硫键连接。Ig可形成“Y”字型...
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培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物,即生长因子。有些微生物,如自养型微生物,不需要碳源,所以上述物质只具有一般性。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基,较长时间的贮存,必须放在...
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酶联免疫试剂盒的简单介绍目前ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面,ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。自从Engvall和Perlman(1971)报道建立ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA(酶联免疫吸附试验,...
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菌种在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。菌种保藏是将微生物菌种采用适宜的方法妥善保藏,避免其死亡、污染,并保持其原有性状基本稳定的一种实验方法,也是微生物实验室极为重要的一项基础性工作。甘油冷冻保藏菌种是目前实验室应用为广泛的一种的菌种保藏方法,原理是以甘油为保护剂,低温冷冻条件下,使微...
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培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。培养...
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细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广义是指可传代的细胞。经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系;已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有永...
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NK细胞分型标志物自然杀伤细胞(Naturalkiller,NK)是细胞毒性淋巴细胞的一种类型,是天然免疫系统的主要组成部分。NK细胞在肿瘤和病毒感染细胞的宿主排斥反应中起重要作用。它们之所以被命名为“Naturalkiller”,是因为初认为它们不需要激活就能杀死“缺失自我识别”的细胞(“缺失自我识别”是用来描述MHC-I类细胞表面标记表达水平较低的细胞,这种情况可能是由病毒感染引起的,或者是在杀伤T细胞的强选择压力下发生的)。NK细胞与ILC1s(1型天然淋巴细胞)具有许...