您的位置: 网站首页 >> 技术文章 >> ELISA检测试剂盒在处理和保存方面要考虑哪几个方面

ELISA检测试剂盒在处理和保存方面要考虑哪几个方面

更新日期: 2019-04-15
浏览人气: 676
   ELISA检测试剂盒通常,酶联免疫反应曲线是规则的,如果曲线不规则说明实验稳定性差,宜做平行样修正。做三平行样取中间值,也可做双平行样,取算术平均值,但做双平行样时两个样本检测值相差>20%时宜将该数值全部删除。在ELISA检测试剂盒中通常有3次加样步聚,即加标本,加酶联系物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行溅起,不行产生气泡。加标本通常用微量加样器,按规则的量参加板孔中。每次加标本应更换吸嘴,避免发作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。
 
  ELISA检测试剂盒在处理和保存方面要考虑以下几个方面:
 
  (1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA检测试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
 
  (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
 
  (3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
 
  (4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
 
  (5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
分享到:
版权所有©2019 上海晅科生物科技有限公司 备案号:沪ICP备19006485号-1
  • 扫一扫,关注我们