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荧光-PCR法的检测局限性体现在哪些方面

更新日期: 2024-03-05
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动物源性成分广泛分布于食品、饲料、化妆品等,与人们的生活息息相关,其中食品和饲料所占的比例大。肉及肉制品掺假成为世界各国共同关注的热点问题,肉食品及其饲料的安全隐患直接关系到人类的安危。近几十年来,以PCR技术为核心的动物源性成分检测获得了广泛应用。
检测方法的局限性:
1)样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
2)样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
3)阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
4)病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
5)不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;
6)试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
7)本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项:
1)所有操作严格按照说明书进行;检验过程中,参照《GB/T 27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测》的规定进行;
2)试剂盒内各种组分使用前应自然融化,混匀并短暂离心;
3)反应液应避光保存;
4)反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5)使用一次性吸头、一次性手套和各区工作服;
6)样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7)实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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