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检测试剂盒在保存中有哪些注意事项

更新日期: 2022-06-27
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  检测试剂盒是一种常用的固相酶免疫测定方法。由于ELISA方法简单,方便,灵敏,特异性强且不需要特殊设备(只需要酶标仪就可以),所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
 
  检测试剂盒是通过酶联免疫吸附反应检测特定物质的试剂盒。检测试剂盒中会有不同浓度的标准样品,它们会与酶标签条中的固相抗原或抗体、酶标记抗原或抗体以及酶底物发生反应。可以形成标准曲线来确定试样。
 
  (1)检测试剂盒要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
 
  (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
 
  (3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
 
  (4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。检测试剂盒标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
 
  (5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
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