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酶联免疫吸附试验方法

更新日期: 2023-08-29
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牛(CaMKKβ)ELISA试剂盒科研实验,不做其他用途。检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。
酶联免疫吸附试验方法:
1、间接法(indirect elisa)
a.将已知抗原吸附于固相载体,酶标记二抗。
b.检测液相中未知抗原。
2、双抗体夹心法(sandwich elisa)
a.将已知抗体吸附于固相载体,酶标记一抗。
b.检测液相中可溶性抗原。
3、竞争法(competitive elisa)
a.将已知抗体或抗原吸附于固相载体,酶标记抗体或抗原。
b.检测液相中可溶性抗原或抗体。
酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
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